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细胞凋亡流式数据处理(细胞凋亡流式细胞图怎么看)

时间:2025-01-03

您关心的流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI),来了!

为进行细胞凋亡的FITC-PI检测,首先收集要用于细胞凋亡检测的细胞,离心并去除培养基。然后,用PBS洗涤细胞一次,重悬于1×Binding Buffer中。对于对照组,使用400μL的1×Binding Buffer,其他处理组则使用100μL的1×Binding Buffer。

最后,将细胞上流式细胞仪检测。细胞凋亡检测:细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生,破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在DNA片段化之前,检测PS的表达,能反映早期凋亡。

**荧光检测**:加入荧光(SA-FLOUS)溶液,于4℃下孵育20分钟。 **检测**:使用流式细胞仪分析FITC荧光与PI荧光的双变量散点图。 **结果判断**:活细胞为(FITC-/PI-),坏死细胞为(FITC+/PI+),凋亡细胞则显示为(FITC+/PI-)。

Q1:(AnnexinV-FITC)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。Q2:(AnnexinV+FITC)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞。Q3:(AnnexinV-FITC)+/PI-,此区域的细胞为早期凋亡细胞。Q4:(AnnexinV-FITC)-/PI-,此区域的细胞为活细胞。